Becon免疫亲和柱Immunoaffinity Column(IAC)
检测原理:
Beacon免疫亲和柱含有特异性抗体紧密附着在载体上,这些抗体可以优先结合粮谷、坚果或者牛奶中萃取混合物中的毒素,粉碎好的样品经过有机溶剂提取并过滤,部分提取物被稀释,过滤并过柱,接下来未结合的物质被清洗掉,用有机溶剂洗脱联结在抗体上的毒素待分析。由于免疫亲和作用具有很高的特异性,所以免疫亲和柱可以很方便地从复杂样品基质中分离其他萃取方法难以萃取的目标化合物。适用于浓缩和纯化粮谷、坚果或者牛奶中萃取出的毒素,以便于荧光,色谱以及免疫分析。
特点:
● 小柱需在4-8℃冷藏,过期试剂不能使用。
● 使用前所有试剂回温到室温下(20-28℃)。但避免在室温下放置时间过久(>24小时)。
● 所检测毒素为剧毒物质,将所有丢弃的液体倒入盛有家用漂白粉(不低于10%)的塑料容器中,所有的实验器具必须在30%家用漂白粉溶液中浸泡至少1小时,戴上手套穿上防护服以避免皮肤及黏膜与试剂或样品萃取物接触,如果一旦接触,必须立即用大量水冲洗。
● 小柱如何与注射器相连:取下小柱顶部的黄色盖帽,用剪刀小心剪去盖帽的封口端,将之放回小柱,再将注射器(10mL或者50mL)与之相连。
牛奶中黄曲霉毒素M1的测定
(参考方法GB 541337-2010 食品安全国家标准 乳和乳制品中黄曲霉毒素M1 的测定)
样品前处理
称取50g牛奶到具塞离心管中,在水浴中加热到35-37℃,4000转离心15min,除去上层乳脂,全部样品待过柱净化
样品过柱净化
● 将免疫亲和柱(SBHL-20-0245)连接于10ml或50ml注射器下。
● 将处理好的样品全部通过免疫亲和柱,控制试样以2mL/min-3mL/min稳定的流速过柱。(注意:空气不能通过柱体)
● 用10mL10%甲醇/水以稳定的流速淋洗柱子两次,弃去全部流出液,并使2mL-3mL空气通过柱体。
● 准确加人1.0mL甲醇:乙腈(2:3)洗脱,流速为1mL/min-2mL/min,收集全部洗脱液于玻璃试管中,供检测用。
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