使用酒精灯时，先要检查灯芯，如果灯芯顶端不平或已烧焦，需要剪去少使其平整，然后检查灯里有无酒精，灯里酒精的体积应大于酒精灯容积的1/4，少于2/3。在使用酒精灯时，应注意，绝对禁止用酒精灯引烧另一盏酒精灯，而应用燃着的火柴或木条来引燃；用完酒精灯，必须用灯帽盖灭，不可用嘴去吹灭，否则可能将火焰沿灯颈压入灯内，引起着火或爆炸。不要碰倒酒精灯，万一洒出的酒精在桌上燃烧起来，不要惊慌，应立即用湿抹布扑盖。
酒精灯灯焰分外焰、内焰、焰心三部分，在给物质加热时，应用外焰加热，因为外焰温度最高。
注意：
●在用酒精灯加热可以用试管、烧瓶、烧杯、蒸发皿来给液体加热，在加热固体时可用干燥的试管、蒸发皿等，有些仪器如集气瓶、量筒、漏斗等不允许用酒精灯加热。（烧杯.烧瓶不可直接放在火焰上加热）
●如果被加热的玻璃容器外壁有水，应在加热前擦拭干净，然后加热，以免容器炸裂。
●加热的时候，不要使玻璃容器的底部跟灯芯接触，也不要离得很远，距离过近或过远都会影响加热效果，烧得很热的玻璃容器，不要立即用冷水冲洗，否则可能破裂，也不要立即放在实验台上，以免烫坏实验台。
●给试管里的固体加热，应行进行预热，预热的方法是：在火焰上来回移动试管，对已固定的试管，可移动酒精灯，待试管均匀受热后，再把灯焰固定在放固体的部位加热。
●给试管里的液体加热，也要进行预热。同时注意液体体积最好不要超过试管体积1/3，加热时，使试管斜一定角度（45°左右），在加热时要不时地移动试管，为避免试管里的液体沸腾喷出伤人，加热时切不可将试管口朝着自己和有人的方向，试管夹应夹在试管的中上部，手应该持试管夹的长柄部分，以免大拇指将短柄按下，造成试管脱落。
●特别注意在夹持时应该从试管底部往上套，撤除时也应该由试管底部撤出。
使用注意事项：
●不能在燃着酒精灯时添加酒精，酒精量不超其容积的2/3，也不能过少。
●严禁用燃着的酒精灯去点燃，用酒精灯的外焰加热物质。
●熄灭时用灯帽盖灭，灯要斜着盖住，否则有危险。
●不用时盖好灯帽，以免酒精挥发。
●酒精灯盖子为塑料盖，塑料较软，密封性相对较差，故盖一次即可。如是玻璃盖，玻璃硬度大，不易形变，密封性好。由于盖灭时消耗盖内氧气，易造成压强差，从而盖会“唑”住，不易打开。所以盖两次，让外部空气进入。
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